Vsebina

• Glavna razlika
• Južna pika vs. Western Blotting
• Primerjalna tabela
• Kaj je južni bloting?
• Kaj je Western Blotting?
• Ključne razlike
• Zaključek

Glavna razlika

Glavna razlika med Southern Blotting in Western Blotting je v tem, da je Southern Blotting tehnika, ki se uporablja za odkrivanje določenega fragmenta DNA v določenem vzorcu, medtem ko se Western Blotting uporablja za iskanje specifičnega proteina v določenem vzorcu.

Južna pika vs. Western Blotting

Pihanje je tehnika, ki jo znanstveniki uporabljajo za ločevanje različnih vrst molekul iz mešanice ali vzorca. V tej tehniki se makromolekule, kot so nukleinske kisline (DNA in RNA), in proteini v mešanici premikajo skozi ploščo gela. Tu se bodo minljivi delci premikali hitreje od večjih. Te molekule se pritisnejo na površino imobilizirane membrane, ki prenaša molekule na membrano. Obstajajo različne vrste peskanja na podlagi odkrivanja določenega materiala, tj. Blokanje s juga, blokanje s severa in zahodno pikanje. Southern blotting je vrsta blottinga, ki se uporablja za zaznavanje DNK, medtem ko se Western blotting uporablja za iskanje beljakovin. Southern blotting je razvil Edward M. Southern leta 1975. Torej je znan kot Southern blotting. Po drugi strani pa je Western blot razvila skupina Georgea Starka na Univerzi Stanford leta 1979. To ime so uporabili za uskladitev z južnim blottingom. Southern blotting se uporablja za iskanje specifičnega zaporedja DNK, medtem ko se s Western blottingom ugotovi določeno zaporedje aminokislin ali beljakovin.

Primerjalna tabela

Južna pika	Western bloting
Tehnika, ki se uporablja za odkrivanje določenega zaporedja DNK v dani mešanici, je znana kot južni blot.	Tehnika, ki se uporablja za odkrivanje določenega zaporedja beljakovin aminokislin v dani mešanici, je znana kot južni blot.
Razvil
Southern blotting je razvil Edward M. Southern leta 1975.	Western peskanje je leta 1979 razvila skupina George Stark na univerzi Stanford.
Vrsta zaznavanja
Southern blotting se uporablja za iskanje specifičnega zaporedja DNK.	Western blotting se uporablja za iskanje specifičnega zaporedja aminokislin ali beljakovin.
Načelo
Deluje na principu hibridizacije.	Deluje na principu metode imunske detekcije ali interakcije antigen-protitelo.
Sonda
Kot sonda se uporablja enojna veriga DNK ali včasih RNA.	Primarna in sekundarna protitelesa se uporabljajo kot sonda.
Gelna elektroforeza
Akrorozna gel elektroforeza se uporablja pri južnem blotingu.	SDS PAGE / Poliakrilamidni gel, ki se uporablja za ločevanje beljakovin pri Western blottingu
Postopek brisanja
Južno pikanje sledi postopku prenosa kapilar.	Western Blotting sledi postopku električnega prenosa.
Vzorec
Med južnim pleskanjem je treba vzorec denaturirati.	Med zahodnim pleskanjem mora biti vzorec v izvornem stanju.
Blokiranje
Noben korak, kot je blokada, ni vključen v južno zatiranje.	V času blokade z blokade se nestrocifična mesta protiteles na nitroceluloznem papirju blokirajo s pomočjo mlečnega prahu ali govejega serumskega albumina (BSA).
Načini označevanja
Pogoste metode označevanja, ki se uporabljajo pri južnem pleskanju, so uporaba kromogenih barvil ali radioaktivno označevanje ali fluorescentno označevanje itd.	Metode označevanja, ki se uporabljajo pri zahodnem peskanju, so uporaba fluorescentno označenega protitelesa ali radioaktivno označevanje, kromogena barvila ali tvorba diaminobenzidina itd.
Metode zaznavanja
Zaznavanje svetlobe, avtoradiograf in spremembe barve se uporabljajo kot metode zaznavanja pri južnem zatiranju.	Metode zaznavanja pri zahodnem piku so spremembe barve in zaznavanje svetlobe itd.
Uporaba
Southern blotting se uporablja pri odkrivanju DNK, testiranju očetovstva, drsanju DNK, za identifikacijo žrtev, za identifikacijo kriminalcev, iskanje povzročiteljev okužb in identifikacijo mutacije ali preureditve genov itd.	Western blotting se uporablja za iskanje števila beljakovin v mešanici, za odkrivanje prisotnosti virusa HIV, virusa in bakterij itd v serumu, za odkrivanje pomanjkljivih beljakovin in se uporablja kot natančen ukrep za herpes, hepatitis B, Lyme bolezen in Creutzfeldt-Jacobova bolezen itd.

Kaj je južni bloting?

Southern blotting je najstarejša metoda piranja, ki jo je tako izdal Edwin Southern, imenovano južno pikanje. Uporablja se za iskanje določenega zaporedja DNK v določenem vzorcu ali mešanici. Koraki med južnim blontom so elektroforeza, prenos in odkrivanje specifičnih sekvenc. Najprej se fragmentizira DNK s pomočjo specifičnega restrikcijskega encima. Nato želene fragmente DNK ločimo z gel elektroforezo. Te fragmente denaturiramo s pomočjo alkalne raztopine, npr. NaOH itd., Da ločimo oba pramena DNK. Ti enocementični fragmenti DNK se nato prenesejo na membrano s postopkom zbrinjavanja. To membransko omejeno DNK nato obdelamo z označeno sondo. Ta sonda se bo pritrdila na njen komplementarni sklop na membranski DNK, ki ga je mogoče vizualizirati z avtoradiogramom itd.

Kaj je Western Blotting?

Metodo Western blot je izumila skupina George Stark na univerzi Stanford, ki se uporablja za določanje določenega zaporedja aminokislin v proteinu. Znan je tudi pod imenom beljakovinski blot ali imunski blot. Koraki med blokado zahoda so elektroforeza, prenos in odkrivanje specifičnih beljakovin. Najprej zmes homogeniziramo. Nato ločite molekulo, ki vas zanima, s pomočjo elektroforeze. Te molekule prenesite na membrano in določite specifični protein s pomočjo posebne sonde.

Ključne razlike

1. Tehnika, ki se uporablja za iskanje določenega zaporedja DNK v dani mešanici, je znana kot južni blot, medtem ko je tehnika, ki se uporablja za iskanje določenega zaporedja aminokislin beljakovin v dani mešanici, znana kot južni blot.
2. Južno pikanje je leta 1975 razvil Edward M. Southern, tako imenovano južno pikanje. Po drugi strani je vestern blot razvila skupina George Stark na univerzi Stanford leta 1979.
3. Southern blotting se uporablja za iskanje specifičnega zaporedja DNK. Nasprotno, Western blot se uporablja za iskanje specifičnega zaporedja aminokislin ali beljakovin.
4. Southern blotting deluje na principu hibridizacije na stranski strani; Western blot deluje na principu metode imunske detekcije ali interakcije antigen-protitelo.
5. Enoverižna DNK ali včasih RNA se uporablja kot sonda pri južnem blottingu na drugi strani, pri Western blotting primarna in sekundarna protitelesa se uporabljajo kot sonda.
6. Elektroforeza gela Agaroza se uporablja pri južnem blottu, medtem ko se SDS PAGE / Poliakrilamidni gel uporablja za ločevanje beljakovin pri Western blottingu.
7. Po drugi strani je južno pikanje po postopku prenosa kapilar; Western Blotting sledi postopku električnega prenosa.
8. Med južnim peskanjem je treba vzorec denaturirati, medtem ko mora biti med zahodnim peskanjem vzorec v izvornem stanju.
9. Noben korak, kot je blokada, ni vključen v južno blottanje na strani, med zahodnim blottingom pa se na nitroceluloznem papirju s pomočjo mlečnega praška ali govejega serumskega albumina (BSA) blokirajo nespecifična protitelesa.
10. Pogoste metode označevanja, ki se uporabljajo pri južnem pleskanju, so uporaba kromogenih barvil ali radioaktivno označevanje ali fluorescentno označevanje itd.
11. Zaznavanje svetlobe, avtoradiograf in spremembe barve se uporabljajo kot metode zaznavanja pri južnem blottu, medtem ko so metode zaznavanja pri zahodnem piku spremembe barve in zaznavanje svetlobe itd.
12. Southern blotting se uporablja pri odkrivanju DNK, testiranju očetovstva, fingingu DNA, za identifikacijo žrtev, za identifikacijo kriminalcev, iskanje povzročiteljev okužb in identifikacijo mutacije ali preureditve genov itd. In obratno, Western blot se uporablja za iskanje števila beljakovin v mešanico, da odkrijejo prisotnost virusa HIV, virusa in bakterij itd v serumu, da ugotovijo pomanjkljive beljakovine in se uporabljajo kot dokončen ukrep za herpes, hepatitis B, lajmsko bolezen in bolezen Creutzfeldt-Jacob itd.

Zaključek

Zgornja razprava povzema, da je južno pikanje najstarejša tehnika pivanja, ki se uporablja za iskanje določenega segmenta DNK v vzorcu, medtem ko so bili slednji odkriti Western blot in uporabljeni za določitev določenega zaporedja aminokislin ali specifičnega proteina.